Missions

- Assurer le clonage de gènes en systèmes bactérien et eucaryote (cellules d’insectes ou de mammifères), la production, la purification, la caractérisation et la cristallisation de protéines recombinantes
- Définir et mettre en place les protocoles expérimentaux en biochimie pour la production de protéines recombinantes et la réalisation des expériences de cristallogenèse

Activités

- Cloner des gènes, mutagenèse dirigée
- Produire et purifier des protéines recombinantes
- Caractériser les échantillons par différentes méthodes biochimiques (électrophorèse, gel natif, western blot) et biophysiques (DLS, ITC, MALS, anisotropie de fluorescence, CD, Thermofluor)
- Réaliser les expériences de cristallogenèse des protéines
- Concevoir les expériences, analyser et présenter les résultats

Compétences

1- Connaissances:
- Posséder des connaissances approfondies en biochimie et biologie moléculaire
- Maitriser les techniques de purification et de caractérisation des protéines
- Maitriser la culture cellulaire
- Connaitre les bonnes pratiques de laboratoire (hygiène et sécurité)
- Maîtriser l'anglais scientifique

2- Savoir-faire:
- Purification de plasmides et extraction d'ADN à l'aide de kits, PCR, clonage In-fusion ou par ligation
- Transformations et transfections, cultures bactérienne et cellulaire
- Extraction et purification des protéines par chromatographie sur système AKTA
- Mise en place des essais de cristallisation, utilisation des robots de cristallogenèse et de visualisation
- Connaissance des principes, du fonctionnement et des règles d'entretien des appareils utilisés
- Être capable d'analyser un problème technique et de proposer des solutions pour le traiter
- Être capable d'initiative, d'anticipation, d'organisation autonome de son travail
- Être capable d’analyser des résultats expérimentaux, de rédiger un rapport sur ses résultats et de présenter un compte rendu d'expériences
- Maîtrise de l'outil informatique (Excel, PowerPoint, GraphPad ou Origin)

3- Aptitudes:
- Rigueur scientifique
- Avoir le sens du travail en équipe et le sens de l'organisation
- Autonomie
- Apprendre des méthodes et techniques nouvelles
- Être capable de communiquer son savoir faire

Contexte de travail

La production de quantités importantes de protéines recombinantes purifiées est une étape clé en biologie structurale, notamment en cristallographie aux rayons X. Le candidat ou la candidate sera rattaché à l'équipe de William Bourguet dont les travaux se concentrent sur les relations structure-fonction de différentes cibles thérapeutiques et environnementales et leurs interactions avec des ligands (naturels, pharmaceutiques, perturbateurs endocriniens). Il ou elle sera supervisé par Jakub Gruszczyk.

Contraintes et risques

Bac+3/4 dans les domaines de la biologie, biochimie, biotechnologies
Merci de soumettre un CV contenant les contacts de 2 personnes référentes.
Expérience en laboratoire de 3 ans minimum sur un sujet touchant à la purification de protéines recombinantes, la culture cellulaire et à la cristallogenèse.
Le contrat initial est prévu pour une durée de 12 mois. Une prolongation pourra être envisagée.