Description du sujet de thèse

Projet de thèse : Régulation de la mise en réserve de l’amylopectine chez le parasite apicomplexe Toxoplasma gondii.
Le projet PSB-Toxo (ANR 2025) vise à disséquer une nouvelle voie de régulation contrôlant la mise en réserve d’amylopectine chez le parasite Toxoplasma gondii.
Toxoplasma gondii est un pathogène eucaryote unicellulaire responsable de la toxoplasmose. Il appartient à l'embranchement des apicomplexes, qui comprend certains des agents pathogènes les plus mortels d'importance médicale et vétérinaire.
La toxoplasmose chronique est due à l'établissement de la forme enkystée du parasite (bradyzoïtes) dans des tissus spécifiques (principalement le cerveau et les muscles). L'installation des kystes de bradyzoïtes dans les neurones ou les cellules musculaires est intéressante en termes de pathologie humaine puisque la réactivation de ces kystes peut conduire à la forme mortelle de la maladie (toxoplasmose cérébrale). Elle est également cruciale pour la transmission, puisque les kystes contenus dans les muscles sont infectieux pour l'homme par la consommation de viande insuffisamment cuite. L'établissement de kystes de bradyzoïtes est donc un élément clé de la pathogenèse chez l'homme et d'autres hôtes intermédiaires. Les bradyzoïtes se divisent lentement et réorganisent leurs voies métaboliques en produisant des grains d'amylopectine qui sont essentiels à leur survie à long terme dans un environnement hostile. Les niveaux d'amylopectine sont étroitement contrôlés car l'excès ou le manque de ce polysaccharide est fortement préjudiciable à la production de kystes. Cependant, la manière dont les niveaux d'amylopectine sont régulés reste à découvrir.
Ces travaux sont basés sur l’identification récente par les deux partenaires de ce projet ANR (Dr Gissot, CIIL et Dr. Dauvillée, UGSF) d’une enzyme possédant une double activité trehalose-6-phosphate synthase/phosphatase (TPSP) dont l’inactivation résulte en une accumulation massive d’amylopectine dans les tachizoïtes (https://doi.org/10.1371/journal.pbio.3002791) . La personne recrutée sera en charge de :

1- La production et la purification de la TPSP sous forme recombinante et des différents modules catalytiques qui la composent.
2- La caractérisation enzymatique de ces différentes protéines recombinantes.
3- L’optimisation d’une méthode de dosages quantitatifs et de haute sensibilité du trehalose et du trehalose-6-phosphate à partir d’extraits de toxoplasmes.
4- La quantification et la caractérisation des amylopectines produites par l’ensemble des parasites modifiés génétiquement afin d’étudier le rôle de cette enzyme in vivo.

Ce projet repose sur des données préliminaires solides et sur du matériel déjà disponible dans les deux laboratoires partenaires. Notre équipe possède une expertise reconnue en glycobiologie et bénéficiera de l’ensemble des infrastructures de l’UGSF. La réalisation du projet en trois ans est pleinement envisagée.
Le doctorant (H/F) bénéficiera d’un encadrement rapproché au début du projet, jusqu’à atteindre une autonomie complète. Il sera inscrit à l’École graduée biologie santé de Lille et encadré scientifiquement par le Dr Dauvillée (UGSF).

Nous recherchons un candidat (H/F) curieux, motivé et rigoureux, titulaire d’un master (ou équivalent) en sciences biologiques, avec une solide formation en biochimie. Un intérêt ou une expérience dans les domaines de l’enzymologie ou/et de la parasitologie serait un atout important.

Contexte de travail

Ce travail s’effectuera au sein de l’équipe BIG (Biological Interaction of Glycans) de l’UGSF (UMR CNRS 8576, Université de Lille) en étroite collaboration avec l’équipe du Dr. Gissot (CIIL, (Inserm U1019; CNRS UMR9017; Université de Lille, Institut Pasteur de Lille, CHU de Lille), dans le cadre du projet ANR PSB-Toxo. Le doctorant (H/F) bénéficiera d’un encadrement adapté, d’opportunités pour développer de nouvelles compétences techniques et analytiques, ainsi que d’un soutien pour élargir son réseau scientifique et renforcer son dossier de publications.

Contraintes et risques

Déplacements possibles pour des conférences ou collaborations.
Risques standard liés au travail en laboratoire de biochimie, notamment l’exposition à des produits chimiques, agents biologiques, environnements thermiques, ainsi qu’au travail prolongé sur écran.