Informations générales
Intitulé de l'offre : Post-doctorat : Caractérisation fonctionnelle et structurale des NAD Kinases humaines et pathogènes (H/F)
Référence : UMR5048-FLOLEP-116
Nombre de Postes : 1
Lieu de travail : MONTPELLIER
Date de publication : lundi 6 octobre 2025
Type de contrat : Chercheur en contrat CDD
Durée du contrat : 12 mois
Date d'embauche prévue : 1 janvier 2026
Quotité de travail : Complet
Rémunération : Entre 3021€ et 4208€ bruts mensuel, selon expérience
Niveau d'études souhaité : Doctorat
Expérience souhaitée : 1 à 4 années
Section(s) CN : 20 - Biologie moléculaire et structurale, biochimie
Missions
Approfondir la compréhension de la régulation enzymatique précise des NAD kinases, et en particulier de la forme cytoplasmique humaine.
Activités
1. Préparer des variants des NAD kinases étudiées par mutagenèse dirigée, urproduction, puri-fication et caractérisation biophysique.
2. Déterminer les structures liées aux ligands des variants et caractériser leur activité enzyma-tique.
3. Proposer des optimisations des inhibiteurs actuels et évaluer la puissance de nouveaux com-posés.
4. Collaborer avec des biologistes sur le mécanisme d’activation des NAD kinases dans les cellules.
Compétences
Ces études s’appuieront sur diverses techniques, notamment :
• Biologie moléculaire (construction de plasmides), y compris la mutagenèse dirigée.
• Production de protéines dans des cellules bactériennes et eucaryotes.
• Tests d’interaction protéine-protéine (ex : anisotropie de fluorescence, ITC).
• Purification de protéines adaptées à l’analyse par cryo-microscopie électronique (cryoEM), SAXS et cristallographie aux rayons X.
• Préparation et visualisation de grilles pour cryoEM.
• Traitement des données de cryoEM.
• Préparation d’échantillons pour la spectrométrie de masse, le smFRET et/ou la RPE.
• Docking de ligands in silico et optimisation de séquence pour la stabilité.
Le candidat ou la candidate doit posséder un doctorat dans le domaine de la biologie.
Contexte de travail
Une caractérisation approfondie des NAD kinases est essentielle pour comprendre leur rôle dans la biologie cellulaire. Il a été démontré que les NAD kinases bactériennes sont essentielles et représentent des cibles thérapeutiques prometteuses. Des avancées plus récentes ont suggéré le rôle des NAD kinases humaines dans l’apparition du cancer et les processus de métastase.
Dans notre groupe, nous avons défini la superfamille d’enzymes à laquelle appartiennent les NAD kinases. Depuis, nous avons résolu de nombreuses structures, ce qui nous a permis de proposer puis de confirmer un mécanisme original de catalyse basé sur le substrat, partagé par les NAD kinases bactériennes et humaines. Nous avons également utilisé une approche originale de criblage de fragments pour concevoir des inhibiteurs puissants.
Plus récemment, nous avons résolu la première structure de la NAD kinase cytoplasmique hu-maine dans sa forme active. Nous avons démontré plusieurs niveaux de régulation par ses ex-tensions N- et C-terminales.
Ce projet post-doctoral vise à approfondir la compréhension de la régulation enzymatique pré-cise des NAD kinases, et en particulier de la forme cytoplasmique humaine. Ces études s’appuieront sur de nombreuses techniques de biologie structurale, telles que la cristallographie aux rayons X, le SAXS, la cryo-microscopie électronique, la RMN et la RPE. Des expériences d’enzymologie résolues dans le temps permettront de révéler des étapes intermédiaires importantes dans le cycle catalytique. Les effecteurs allostériques seront caractérisés, de même qu’une éventuelle régulation par interaction avec les membranes. Les changements conformationnels et la flexibilité seront explorés à l’aide de techniques complémentaires (SAXS, RPE, affinement d’ensembles, cryo-EM, etc.).
Environnement:
Le CBS est un institut de recherche dynamique doté d’infrastructures exceptionnelles couvrant l’ensemble des techniques de biologie structurale et de biophysique, notamment la RMN, la cristallographie aux rayons X, la cryo-microscopie électronique, la microscopie de fluorescence avancée et à super-résolution, la manipulation de molécules uniques, la biologie moléculaire et cellulaire, ainsi que le calcul haute performance. Cette richesse technologique permet de mener des projets scientifiques ambitieux grâce à des approches intégrées et multi-échelles.
Montpellier est un pôle majeur en biologie, avec une forte orientation vers la recherche fondamentale, la biomédecine, la biologie végétale et les sciences de l’environnement.
Dans le cadre d’un poste financé par la Fondation pour la Recherche Médicale, le candidat ou la candidate rejoindra le groupe “A.B.C.I.S.” dirigé par Gilles Labesse et Corinne Lionne.
https://www.cbs.cnrs.fr/index.php/en/home-equipea4
Contraintes et risques
Les candidats ou les candidates intéressés déposeront leur CV, une lettre de motivation
décrivant leurs intérêts scientifiques et motivations, ainsi que les noms de deux personnes prêtes à rédiger une lettre de recommandation.
Contrat initial d'une durée de 12 mois, renouvelable.