Missions

L'ingénieur (H/F) sera affecté à l'équipe « Tubulin Code » et participera aux projets portant sur les modifications post-traductionnelles (MPTs) des microtubules.
Il/elle sera activement impliqué dans les différents projets scientifiques de l'équipe en assistant ou en assumant en totalité l'aspect biochimique de ces projets. L'ingénieur (H/F) utilisera des protocoles déjà établis au sein de l'équipe, les optimisera et développera de nouveaux protocoles afin d'assurer la production et/ou la purification de protéines afin de pouvoir effectuer diverses expériences in vitro. Par ailleurs, l'ingénieur (H/F) assurera la production de plasmides pour l'expression de différentes constructions génétiques dans des bactéries, des cellules humaines en culture ou chez la drosophile.
D'autre part, l'ingénieur (H/F) occupera la position de Lab manager afin d'assurer la bonne gestion de l'équipe. Ce rôle inclue les commandes, la gestion des crédits de l'équipe, l'organisation générale du laboratoire ainsi que l'aide aux démarches administratives au sein de l'équipe (par exemple réservation des missions). Ces tâches seront effectuées en collaboration avec le service gestion de l'institut.

Activités

- Concevoir et appliquer les protocoles de biologie moléculaire pour la préparation des plasmides.
- Mise au point de protocoles et réalisation d'expériences de biochimie pour la production/purification et caractérisation des protéines et de complexes en système bactérien et en systèmes cellulaires eucaryotes (cellule d'insectes, tissus).
- Transfection de cellules (siRNA, surexpression de protéines étiquetées) et maintien des lignées cellulaires.
- Analyse des niveaux d'expression de protéines ou de MPTs par Western Blot.
- Immunofluorescence et immunohistochimie.
- Microscopie à épifluorescence et confocale pour imagerie de cellules fixées et vivantes.
- Caractérisation biochimique et fonctionnelle des protéines.
- Choisir, développer et adapter les protocoles pour les essais in vitro de modification post-traductionnelle (polyglutamylation, detyrosination...).
- Préparation d'échantillons pour les études structurales.
- Analyse, suivi et contrôle des résultats et de la qualité des données obtenues.
- Gérer les stocks et les commandes de réactifs biologiques et de consommables nécessaires à la réalisation des expériences.
- Formation des nouveaux utilisateurs aux techniques et équipements du laboratoire.
- Participation à la gestion des crédits de l'équipe.
- Veille technologique et rédaction de procédures expérimentales et de compte-rendu d'expériences.
- Diffuser et valoriser les résultats et les réalisations technologiques sous forme de rapports, publications, brevets, présentations orales.
- Organiser et assurer le respect des mesures d'hygiène et de sécurité liées aux activités expérimentales : évaluation des risques biologiques, élaboration des procédures afin de maîtriser les risques.

Compétences

Connaissances et savoir-faire :
- Biologie moléculaire (PCR, clonage, amplification de plasmides, constructions de mutants...).
- Production de protéines dans E. coli et en système Baculovirus.
- Purification de protéines basée sur des étiquettes (His-Tag, Strep-Tag, etc...).
- Biochimie préparative des protéines (extraction de protéines, système de purification Äkta, HPLC, Elisa, ultracentrifugation, SDS-PAGE, nanodrop, Western Blot...).
- Culture cellulaire.
- Formations recommandées : biologie, biochimie, biotechnologie.
- Langue anglaise : B1 à B2 (cadre européen commun de référence pour les langues).

Savoir-être :
- Savoir travailler en équipe pluridisciplinaire.
- Sens de l'organisation.
- Autonomie, proactivité, rigueur, créativité.
- Éthique professionnelle.
- Capacité de communication et esprit de synthèse.
- Fort esprit d'équipe.

Contexte de travail

L'agent sera affecté à l'équipe « Tubulin Code » et sera placé sous la responsabilité du chef d'équipe. L'Institut de Génétique Humaine (IGH) de Montpellier (UMR 9002) est une unité mixte de recherche CNRS - Université de Montpellier comprenant 20 équipes de recherche couvrant divers domaines de recherche dont la dynamique du génome et de la chromatine, la génétique du développement, le contrôle épigénétique et les pathologies moléculaires et cellulaires. L'IGH possède des équipements de pointe en microscopie et bénéficie des plateformes technologiques de l'UAR Biocampus.

L'équipe s'intéresse aux MPTs présentes sur les queues C-terminales des tubulines alpha et beta qui composent les microtubules et qui sont exposées à leur surface, permettant de moduler l'interaction de certaines protéines avec les microtubules. L'équipe cherche à identifier les enzymes qui génèrent ces MPTs et à comprendre le rôle physiologique de ces MPTs, en utilisant différents modèles de recherche tels que des cellules humaines en culture mais aussi la drosophile et la souris.
L'équipe a identifié de nouvelles enzymes responsables de certaines de ces MPTs, ainsi qu'une nouvelle modification qui affecte la chaine primaire de la beta-tubuline dans des cellules humaines. L'équipe a également identifié une nouvelle enzyme modifiant l'alpha-tubuline chez la drosophile. Les projets de l'équipe visent à caractériser biochimiquement ces nouvelles enzymes, déterminer leurs structures et interactions avec les microtubules et à déterminer le rôle de ces MPTs sur la fonction des microtubules in vivo dans des cellules humaines ou chez la drosophile. L'équipe développe des inhibiteurs de ces enzymes, en collaboration avec des chimistes, et est impliquée dans la valorisation de ces inhibiteurs.
L'équipe « Tubulin Code » est constituée de 3 chercheurs titulaires et accueille des étudiants de master. Elle bénéficie de plusieurs financements (équipe FRM, ANRs...).