Missions

L'Assistant.e Ingénieur.e recruté.e accompagnera les équipes de l'unité MCD (CBI, Toulouse)
développant des approches de biochimie des protéines et des ARN. L'Assistant.e Ingénieur.e travaillera
sous la responsabilité d'une cheffe d'équipe, le poste étant mutualisé entre l'équipe entre deux
équipes. Il/elle mettra en œuvre différentes techniques de purification et de caractérisation
biochimique de machineries moléculaires et apportera son soutien au pilotage des appareillages dédiés
(fractionnement cellulaire, purification, chromatographie d'affinité...). Cette personne assumera la
fonction de personnel technique référent d'un plateau commun dédié à ces approches. Il/elle assurera
la formation des utilisateurs, centralisera les savoir-faire techniques et les mettra au service de la
communauté MCD.

Activités

ACTIVITES PRINCIPALES :

- produire et purifier des protéines recombinantes : culture bactérienne de type E. coli,
chromatographie d'affinité et d'exclusion et HPLC, analyses par électrophorèse SDS-PAGE, techniques
d'études des interactions moléculaires ;
- réaliser des fractionnements cellulaires et purifications de particules protéiques et/ou de type
RNP (ex : ribosomes, polysomes... ) par sédimentation sur gradients de densité ;
- préparer les échantillons (ARN totaux ou spécifiques) pour des analyses de séquençage de type RNA-
Seq, Nanopore...
- porter assistance aux utilisateurs pour le pilotage des différents appareillages en lien avec les
analyses biochimiques des protéines, ARN et complexes RNP (ultracentrifugeuses, collecteurs de
gradients type ISCO Teledyne, systèmes de purification de protéines HPLC type AKTA Pure) et la
préparation d'échantillons pour leur caractérisation structurale et/ou protéomique.

ACTIVITES ASSOCIEES :

- Former les nouveaux utilisateurs à l'utilisation du matériel ;
- Centraliser des savoir-faire relatifs aux différentes techniques ;
- assurer l'entretien des équipements et gérer les achats de consommables.

Compétences

Savoirs Fondamentaux :

- Maîtrise approfondie des techniques récentes de biologie moléculaire et biochimie en lien avec la
caractérisation des protéines et de complexes associés à l'ADN/ARN (RNP)
- Maîtrise de l'anglais scientifique et technique écrit (B1), compréhension de l'anglais parlé ;
- Réglementation en matière d'hygiène et de sécurité.

Savoir-faire opérationnels :

- Connaissances techniques sur les protocoles de biochimie des protéines, ARN et complexes RNP
(préparation et fractionnement d'extraits cellulaires, chromatographie d'affinité et d'exclusion) ;
- Connaissances techniques sur le pilotage et la maintenance des équipements dédiés
(ultracentrifugeuses, collecteurs de gradients, systèmes de purification de protéines type AKTA Pure
etc.) ;
- Connaissances pour l'adaptation et l'optimisation des protocoles expérimentaux
d'expression/purification de protéines et de complexes RNP aux différents projets scientifiques des
équipes de l'unité.
- Appétence pour apprendre : des formations seront proposées selon l'expertise et/ou pour compléter
le savoir-faire.

Contexte de travail

L'Assistant.e Ingénieur.e rejoindra l'unité MCD du Centre de Biologie Intégrative (CBI) de Toulouse,
située sur le Campus de l'Université Paul Sabatier (UT3). L'activité de recherche de nombreuses
équipes de l'unité MCD, au sein principalement des programmes « RNA Biology » et « CODE », vise à
décrypter les mécanismes d'expression, d'assemblage et de contrôle qualité de machineries moléculaires
ainsi que leur organisation structurale et leur mode d'action. Dans ce contexte, la purification de
protéines, ARN et de complexes moléculaires à partir de leur environnement cellulaire natif a toujours
été une activité importante et internationalement reconnue de l'unité MCD. Elle a permis
l'établissement de nombreuses collaborations internes au CBI et internationales, et a été un atout
puissant pour le recrutement de nouvelles équipes et le développement de nouveaux thèmes de recherche
à MCD. L'assistant.e ingénieur.e appuiera notamment les activités de 2 équipes et intègrera un plateau
commun de préparation / purification de macromolécules biologiques (ribosomes procaryotes, d'archaea
et eucaryotes, mini-chromosomes, exosomes...) pour l'unité MCD.