Description du sujet de thèse

Les objectifs de ce travail seront (i) d'étudier l'activité immunomodulatrice des vésicules extracellulaires issues de cellules stromales ou des bactéries pour le traitement de la maladie de Crohn fistulisée ; et (ii) comparer les propriétés immunomodulatrices des vésicules produites par différentes méthodes.
Le travail sera réalisé en 2 parties :
A) Développement des tests d'activité
- Culture d'une lignée cellulaire d'adénocarcinome du côlon humain et d'une lignée cellulaire du côlon humain immortalisée
- Mesure de leur production de cytokines pro-inflammatoires par dosage d'électrochimiluminescence multiplexe (production basale versus production après stimulation TNFα)
- Mise au point du protocole de stimulation optimal et des conditions de contrôle optimales

B) Comparaison de l'effet des vésicules produites par différentes méthodes sur la production de cytokines pro-inflammatoires par les cellules du côlon humain activées par le TNFα en utilisant un dosage par électrochimiluminescence multiplexe
Des preuves récentes de notre équipe ont montré le potentiel prometteur des vésicules extracellulaires (EV) produites à partir de cellules stromales mésenchymateuses adipeuses (ADSC) dans cette indication. Les EV sont des entités subcellulaires liées à la membrane (40-5000 nm) contenant des protéines, des lipides et des acides nucléiques sécrétés par les cellules de manière constitutive ou induite.
Il a déjà été démontré que le transport des EVs dépend fortement de leur processus de production, avec un impact potentiel sur leurs propriétés thérapeutiques. Par conséquent, il existe un besoin impératif de développer des tests d'activité in vitro fiables pour comparer les propriétés de différents lots d'EVs et prédire leur effet thérapeutique in vivo. Ce seront les principales activités de cette thèse qui s'intéressera également aux EV issus de bactéries dans une approche comparative.
Des preuves récentes de notre équipe ont montré le potentiel prometteur des vésicules extracellulaires (EV) produites à partir de cellules stromales mésenchymateuses adipeuses (ADSC) dans cette indication. Les EV sont des entités subcellulaires liées à la membrane (40-5000 nm) contenant des protéines, des lipides et des acides nucléiques sécrétés par les cellules de manière constitutive ou induite.
Il a déjà été démontré que le transport des EVs dépend fortement de leur processus de production, avec un impact potentiel sur leurs propriétés thérapeutiques. Par conséquent, il existe un besoin impératif de développer des tests d'activité in vitro fiables pour comparer les propriétés de différents lots d'EVs et prédire leur effet thérapeutique in vivo. Ce seront les principales activités de cette thèse qui s'intéressera également aux EV issus de bactéries dans une approche comparative.

Compétences : Culture cellulaire
Caractérisation des vésicules par nanoparticle tracking analysis et dosage de protéines
Tests de potency In vitro

Une expertise (au moins 6 mois) en matière de caractérisation des vésicules extracellulaires est absolument exigée
Une expérience sur les tests de potency de vésicules est absolument exigée

Contexte de travail

Le laboratoire Matière et Systèmes Complexes (MSC) (http://www.msc.univ-paris-diderot.fr/) unité mixte de l'Université de Paris (faculté des sciences) et du CNRS regroupant 160 chercheurs, enseignant chercheurs et personnels techniques, étudiants, postdoctorants et apprentis) développe une physique interdisciplinaire, au contact de la chimie, les sciences du vivant et la médecine. Plusieurs projets d'envergure autour de la nano-médecine, de la morphogenèse, du contrôle du vivant, des thérapies cellulaires, de la mécanobiologie et des vésicules extracellulaires sont ainsi développés au laboratoire MSC, en très forte interaction avec de nombreux partenaires biologistes, chimistes et médecins, et avec un fort potentiel de valorisation.
L'antenne MSC-Med du laboratoire MSC (Université de Paris/CNRS), dédiée à l'interface physique/médecine/innovation, a été créée en 2018 sur le campus Saint Germain (rue des Saints Pères)(700 m2). Afin de mieux répondre aux enjeux économiques d'une recherche translationnelle, de la paillasse au patient, MSC-Med va au-delà d'un pont fondamental entre la physique et la médecine et propose un espace pilote, qui s'ouvre sur le monde socio-économique et qui revisite l'interaction entre laboratoire de recherche, étudiants et entrepreneurs. MSC-Med est un outil original de recherche, regroupant une vingtaine de physiciens, médecins, pharmaciens, biologistes, ingénieurs, entrepreneurs, étudiants autour de l'ingénierie du vivant et de la médecine mêlant des activités de recherche, de formation, d'innovation et d'entreprenariat par une organisation originale dédiées aux échanges entre chercheurs, étudiants et start-ups autour des biotechnologies pour la santé.

Le poste se situe dans un secteur relevant de la protection du potentiel scientifique et technique (PPST), et nécessite donc, conformément à la réglementation, que votre arrivée soit autorisée par l'autorité compétente du MESR.