Informations générales
Intitulé de l'offre : Chercheur post-doctoral (H/F) : Ciblage peptidique des siRNA vers les RISC pour augmenter leur activité biologique
Référence : UPR4301-LAELEG-039
Nombre de Postes : 1
Lieu de travail : ORLEANS
Date de publication : mercredi 4 décembre 2024
Type de contrat : Chercheur en contrat CDD
Durée du contrat : 18 mois
Date d'embauche prévue : 1 mars 2025
Quotité de travail : Complet
Rémunération : entre 2 991 € et 4 166 € selon expérience
Niveau d'études souhaité : Doctorat
Expérience souhaitée : 1 à 4 années
Section(s) CN : 20 - Biologie moléculaire et structurale, biochimie
Missions
Cinq siRNA sont approuvés cliniquement donc 4 conjugués avec des saccharides. Néanmoins, leur efficacité thérapeutique est encore limitée par la très faible proportion de siRNA qui atteint le RNA Induced Silencing Complex (RISC) après internalisation. Le travail proposé consiste en une approche inédite de ciblage intracellulaire du siRNA au RISC. Un chargement accru des siRNA dans le RISC se traduira par une activité biologique drastiquement augmentée à dose équivalente. Le RISC sera ciblé par conjugaison de peptides au siRNA. L'évaluation de ces conjugués comprend la synthèse des peptides, la conjugaison des peptides au siRNA et la purification et caractérisation des conjugués. Différents linkers seront comparés tant au niveau de l'interaction avec des protéines recombinantes in vitro que du silençage sur modèles cellulaires.
Activités
Purification de peptides
Conjugaison de peptides aux siRNA
Caractérisation des conjugués
Etudes d'interactions moléculaires par Biolayer interferometry, FIDA, filter binding assay
Electroporation de cellules et quantification du silençage
Compétences
Le candidat doit disposer de compétences en chimie de conjugaison et en chimie analytique (LC-MS).
Expérience en chimie de conjugaison
Compétences en purification de protéines
Une expérience avec les acides nucléiques serait un plus mais n'est pas un prérequis
Capacité à travailler de façon autonome et avec rigueur
Contexte de travail
Le CBM (UPR 4301) est une unité propre du CNRS de 140 personnes où plusieurs équipes travaillent en synergie à l'interface entre physique, biologie et chimie ( http://cbm.cnrs-orleans.fr ).
La personne recrutée exercera ses activités au sein de deux équipes. L'équipe « Assemblages Macromoléculaires et Systèmes Complexes » (http://cbm.cnrs-orleans.fr/en/research/research-teams/fundamental-and-translational-aspects-of-health-and-well-being-team/molecular-assemblies-and-complex-systems/ ) et l'équipe Protéines de Synthèse et Chimie Bio-orthogonale (http://cbm.cnrs-orleans.fr/en/research/research-teams/equipe-aspects-moleculaires-du-vivant/synthetic-protein-and-bioorthogonal-chemistry/ ).
Ce recrutement est financé dans le cadre du projet Emergence@CNRS Chimie 2025 "Ciblage peptidique des siRNA vers le RISC" .
Contraintes et risques
Les risques sont liés essentiellement avec les manipulations de produits chimiques et à la culture de lignées cellulaires.
Une des expériences implique la manipulation d'isotopes radioactifs (32P)