Missions

La sclérose latérale amyotrophique (SLA)/maladie de Charcot, est une maladie causant la dégénérescence progressive des neurones moteurs (NMs), entrainant une paralysie musculaire et le décès 1 à 5 ans après le début des symptômes. TDP-43 est une protéine clé dans la SLA. Bien que majoritairement localisée dans le noyau, elle est exportée dans le cytoplasme où elle régule différents processus cellulaires essentiels. Dans la SLA, TDP-43 forme des inclusions cytoplasmiques dans les NMs et d’autres tissus comme le muscle squelettique. Plus de 50 variants pathogènes de TDP-43 ont été identifiés dans 2 à 5 % des cas familiaux et 1,5 % des cas sporadiques de SLA. Pascal Leblanc, Directeur de recherche CNRS à l’Institut NeuroMyoGène (INMG-PGNM) a récemment identifié le nouveau variant G376V-TDP-43, associé à une myopathie distale, mais pas une SLA. En revanche, un autre variant touchant le même résidu (G376D) provoque une SLA, illustrant ainsi le premier cas où des substitutions du même acide aminé engendrent des maladies distinctes : myopathie versus SLA.
Le projet cherche à comprendre pourquoi le variant G376V affecte uniquement les muscles tout en épargnant les NMs.

Le projet sur lequel participera l’ingénieur portera sur l’identification des mécanismes moléculaires et cellulaires qui protègent les NMs, et la recherche de facteurs capables de supprimer la pathogénicité de ce variant dans les NMs. Des cellules souches pluripotentes induites (iPSCs) dérivées de patients seront utilisées pour évaluer l’impact fonctionnel des variants G376V et D dans les NMs et les cellules musculaires.

Activités

• Mise en place et réalisation des expériences décidées en concertation avec le responsable scientifique.
• Mettre en œuvre la différenciation de cellules iPSC en cellules neuronales et musculaires
• Analyser les défauts pathologiques dans les neurones moteurs et les cellules musculaires dérivées des iPSC par des expériences de biochimie (Western blotting, immunoprecipitations) et d’immunofluorescence par microscopie confocale.
• Expression de protéines recombinantes en bactéries

Compétences

Nous cherchons un(e) candidat(e) sérieux(se) et motivé(e)
Savoir faire :
• Avoir une solide expertise en culture cellulaire des cellules iPSC humaines et leur différenciation.
• Transfection
• Réaliser des immuno-marquages (microscopie confocale)
• Utiliser un microscope confocal
• Connaissances en analyse d’images
• Techniques de biochimie (Western blotting, immunoprécipitations, expression de protéines recombinantes etc…)
• Analyser ses résultats, les mettre en forme (cahier de laboratoire) et les présenter en réunion d’équipe avec son encadrant.
Savoir/connaissances :
• Connaissances en biologie cellulaire et moléculaire, neurobiologie.
• Niveau d’anglais suffisant pour échanger avec les chercheurs, étudiants français et étrangers / lire et comprendre les publications scientifiques
Savoir être:
• Interagir au sein d’un groupe/capacité à travailler en équipe
• Grande rigueur scientifique
• Aimer tester et mettre au point de nouvelles techniques

Contexte de travail

L’ingénieur recruté sera rattaché à l’équipe Interactions neurones muscle dirigée par le Pr Laurent Schaeffer (INMG-PGNM; UMR5261, Faculté de Médecine Rockefeller, Lyon), sous la responsabilité du Dr Pascal Leblanc (Directeur de recherche CNRS).
En intégrant le CNRS, nous vous proposons :
• Un environnement de travail stimulant aux contacts des personnels de la recherche
• 44 jours de congés / RTT par an
• D'excellentes conditions de travail (horaires flexibles, télétravail)
• Un restaurant d'entreprise qui permet de déjeuner à un prix intéressant
• Le remboursement partiel des titres de transport (75%) + forfait mobilité durable pouvant aller jusqu'à 300€/an
• Un site accessible en transport en commun + parking privé
• Participation financière au frais de mutuelle

Contraintes et risques

• Risque biologique
• Travail en laboratoire de type L2
• Travail quelques heures le samedi si nécessaire. Adaptation aux rythmes de croissance et de différenciation des cellules iPSC.