Missions

L'ingénieur-e en techniques biologiques assure la responsabilité technique et opérationnelle des
équipements d'électrophysiologie cellulaire à haut-débit de l'unité. A ce titre, en lien avec les
différents porteurs de projets, il/elle devra choisir, adapter et mettre en œuvre des techniques de
biologie moléculaire et des protocoles d'électrophysiologie cellulaire afin d'examiner le
fonctionnement, la régulation et la pharmacologie de canaux ioniques dans différents contextes
physiologiques et physiopathologiques cardiaques. Il/elle sera en outre responsable de la gestion des
librairies de composés (chimiques ou peptidiques) utilisés pour les procédures de criblage en patch
clamp automatique à haut débit.

Activités

- Coordonner et organiser l'utilisation des équipements d'électrophysiologie à haut-débit
- Veiller au bon fonctionnement et à la maintenance de ces équipements en lien avec les
prestataires
- Conduire des expériences d'électrophysiologie cellulaire (patch-clamp manuel, patch-clamp à
haut-débit, mesure d'impédance et potentiels de champ à haut-débit...) sur des cardiomyocytes
primaires ou dérivés de cellules souches pluripotentes induites (iPSC-CM) et des cellules
d'expression hétérologue (lignées cellulaires HEK-293, COS7, CHO...)
- Analyser et interpréter des données de patch-clamp et restituer les résultats auprès de
l'équipe
- Rédiger les procédures nécessaires au bon fonctionnement des équipements et les protocoles
mis en œuvre
- Mettre au point et réaliser des mutagenèses dirigées, mutagenèses par assemblage Gibson et
clonages moléculaires pour générer les construits d'ADNc codant pour les canaux ioniques à étudier
ou leurs régulateurs
- Mettre au point et réaliser l'isolement, la culture primaire et l'infection virale de
cardiomyocytes ventriculaires de souris nouveau-nées et adultes
- Réaliser la culture et transfection de cellules d'expression hétérologue (cellules HEK-293,
COS7, CHO...)
- Maintenir, alimenter et annoter les librairies de composés chimiques et de peptides naturels
utilisées pour les criblages à haut débit
- Maintenir et annoter les librairies de plasmides utilisées pour les transfections
transitoires.

Compétences

SAVOIRS / CONNAISSANCES :
- Bonnes connaissances théoriques et pratiques en électrophysiologie cellulaire
- Bonnes connaissances en biologie moléculaire
- Notions de pharmacologie in vitro (produits naturels et synthétiques)


SAVOIR-FAIRE :
- Patch-clamp manuel et à haut-débit (expérimentation, analyse et interprétation des données)
- Criblage à haut-débit de composés pharmacologiques
- Isolement, culture primaire et infection virale des cardiomyocytes ventriculaires de souris
nouveau-nées et adultes
- Culture et transfection de cellules d'expression hétérologue
- Mutagenèse dirigée, mutagenèse par assemblage Gibson et clonage moléculaire
- Utilisation des logiciels dédiés tels que Ape, pClamp
- Analyse de données à haut-débit via l'utilisation et l'adaptation de routines R


SAVOIR-ÊTRE :
- Forte autonomie
- Sens de l'organisation
- Capacité d'analyse
- Travail en équipe
- Force de propositions
- Capacité d'adaptation
- Capacité de synthèse
- Sens du service : réalisation de missions collectives au sein de l'équipe et de l'unité
(responsabilité salle d'électrophysiologie cellulaire haut-débit, astreintes)

Contexte de travail

L'ingénieur-e travaillera au sein de l'équipe II « Canaux ioniques et cardiopathies » de l'unité de
recherche de l'institut du thorax à Nantes sous la responsabilité de deux Directeurs de recherche
INSERM. L'équipe est composée de 40 ETP, dont 10 personnels ITA titulaires et contractuels. Il / elle
sera en charge de ses propres projets de recherche scientifique en électrophysiologie cellulaire, et
exercera aussi des missions collectives au sein de l'équipe telles que l'isolement, la culture et
l'infection des cardiomyocytes ainsi que les travaux de biologie moléculaire pour l'ensemble des
membres. L'ingénieur-e participera à la formation des stagiaires et étudiant.e.s. Il / elle assurera
des astreintes réparties librement sur l'année pour le suivi des enceintes thermostatées de l'unité.


https://www.institutduthorax.org/