Missions

Nous sommes à la recherche d’un(e) ingénieur(e) d’étude spécialisé(e) en biochimie, biophysique pour étudier des protéines de la machinerie de réplication des Coronavirus (CoV), virus à ARN. Les Coronavirus utilisent pour répliquer leur long génome, une machinerie sophistiquée, comprenant une variété de protéines non structurales (nsp), dont l'enzyme clé, l'ARN polymérase ARN-dépendante (RdRp) nsp12 et une 3'-5' exoribonucléase (ExoN ; nsp14). L’ingénieur(e) d’étude sera impliqué dans la caractérisation des nsp14 chez les différents genres de CoV, en présence de leur(s) cofacteur(s) métallique(s) physiologique(s), du zinc et/ou des centres centre fer-soufre (Fe-S), par des approches biochimiques et biophysiques. L’interaction des nsp14 avec nsp12 sera également étudiée. Le candidat devra également préparer des échantillons de qualité pour des études spectroscopiques (RPE et Mössbauer) et structurales. Les missions du candidat s’inscrivent dans un projet financé par l’ANR.

Activités

La personne recrutée sera en charge de gérer les cultures permettant l’expression recombinante des protéines nsp14 et nsp12 (dans cellules bactériennes et/ou eucaryotes); purifier les protéines d’intérêt; gérer la préparation et les stocks d’échantillons protéiques pour les études biochimiques (dosages de métaux, activité enzymatique), biophysiques (MALS-RI, BLI, dichroisme circulaire), spectroscopiques (RPE, UV-visible, Mössbauer) et structurales. La personne devra mettre en forme ses résultats sur un cahier de laboratoire. Activités complémentaires : rédaction de protocoles de laboratoire.

Compétences

Connaissance scientifique dans le domaine de recherche : microbiologie, biochimie, biophysique.
- Culture de cellules bactériennes et eucaryotes
- Techniques classiques de biologie moléculaire (électroporateur, extraction d’ADN), de biochimie (dosage d’activité enzymatique, dosages colorimétriques, techniques chromatographiques (AKTA, BioRAD, …)).
- Utilisateur d’outils informatiques (enregistrement de données, pilotage d’appareils)
- Communication : transmission savoir-faire, rédaction
- Savoir-être : Sens de l’organisation, régularité ; Sens de la qualité, rigueur ; Capacité à expliciter les besoins ; Capacité à travailler en autonomie comme en équipe

Contexte de travail

Le laboratoire de Chimie et Biologie des Métaux est une unité mixte de recherche (CEA-CNRS-Université Grenoble-Alpes). Le LCBM mène des travaux à l'interface de la chimie et de la biologie. Ces travaux portent sur l'étude de la structure, de l'activité et de la régulation des systèmes biologiques complexes transportant et utilisant des ions métalliques. L’unité est composée de 8 équipes, et le poste proposé se situe dans l’équipe Biocatalyse qui s’intéresse à la maturation et activité des métalloprotéines. L’équipe BioCat comprend 5 chercheurs, 2 enseignants chercheurs, 3 ITA (1 Tech, 1 IR et 1 AI) et 5 étudiants. Le candidat sera encadré par Sandrine Ollagnier de Choudens (directrice de recherche au CNRS). Le LCBM est localisé sur le site CEA de Grenoble.

Contraintes et risques

Contrainte : Travail en boite à gants (50% du travail).